胰腺导管腺癌(PDAC)是全球最恶性的肿瘤之一，5年生存率仅12%，化疗耐药是主要治疗瓶颈。吉西他滨(GEM)作为一线化疗药物，其疗效常因肿瘤细胞获得性耐药而受限。近年研究发现，泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system)调控的蛋白稳定性与肿瘤进展密切相关，其中去泛素化酶(Deubiquitinases, DUBs)可通过移除底物蛋白的泛素链影响其功能。USP10作为DUBs家族成员，在多种癌症中呈现"双刃剑"作用，但其在PDAC中的分子机制尚未明确。

天津医科大学第二医院孙金金团队联合多机构研究人员，通过分析TCGA、CPTAC等5大数据库，发现USP10在PDAC中显著高表达且与不良预后相关。研究采用免疫组化(IHC)验证了18例临床样本中USP10蛋白的上调现象，并通过体外实验证实USP10敲低可抑制PDAC细胞(PANC-1/MIAPaCa-2)增殖、迁移和侵袭能力，而过表达则促进SW1990细胞恶性表型。动物实验进一步显示，USP10敲除显著延缓了移植瘤生长。

为阐明机制，研究者运用免疫共沉淀-质谱(IP-MS)技术筛选出PLK1(Polo-like kinase 1)作为USP10的关键作用靶点。通过GST pull-down和CO-IP实验证实两者直接相互作用，且USP10通过其N端1-206氨基酸域结合PLK1的307-603氨基酸域。重要的是，去泛素化实验揭示USP10能显著降低PLK1的泛素化水平，而蛋白酶体抑制剂MG132处理可阻断PLK1降解，证实USP10通过泛素-蛋白酶体途径维持PLK1稳定性。

研究进一步发现USP10-PLK1轴通过调控自噬影响GEM敏感性：在EBSS饥饿条件下，USP10敲低导致LC3-II/Beclin1减少和p62积累，电镜观察显示自噬小体数量下降；而过表达PLK1可部分逆转USP10缺失引起的自噬抑制。功能实验表明，USP10敲除使PDAC细胞对GEM的IC₅₀
值降低2-3倍，联合自噬激活剂RAPA处理可部分恢复化疗耐药性。最后，体内实验证明USP10抑制与GEM联用具有协同抗肿瘤效应，为临床联合策略提供依据。

关键技术方法包括：1) 多数据库(TCGA/CPTAC/GEO)生物信息学分析；2) 18例临床样本免疫组化验证；3) 细胞功能实验(CCK-8/EdU/Transwell)；4) IP-MS筛选互作蛋白；5) 体内外去泛素化实验；6) 自噬双标病毒(mCherry-EGFP-LC3B)示踪；7) 裸鼠移植瘤模型。

主要结论：

1. USP10在PDAC中高表达且是独立预后因子
2. USP10通过去泛素化稳定PLK1蛋白
3. USP10-PLK1轴激活自噬通路促进GEM耐药
4. USP10抑制剂与GEM联用具有协同治疗效果

该研究首次揭示USP10-PLK1-自噬轴在PDAC化疗耐药中的核心作用，不仅完善了DUBs调控网络的理论框架，更为克服PDAC耐药提供了"靶向USP10+常规化疗"的新型联合治疗策略。值得注意的是，研究者采用临床样本-细胞模型-动物实验的多层次验证体系，增强了结论的可靠性。未来研究可进一步探索USP10抑制剂开发及与其他靶向药物的联用方案。